皂荚EST-SSR分子标记开发与分析评价
作 者:林富荣,邢俊连,孟艳琼,黄平,郑勇奇
期刊名称:植物遗传资源学报
影响因子:
卷 期 号:18(1)
页 码:148~154
关键词:皂荚; 转录组; EST-SSR; 多态性; 通用性
论文摘要:
本研究旨在开发皂荚 EST-SSR 分子标记,为今后皂荚种质资源评价与分析提供基础。首先通过对已公布的皂荚转录组数据进行拼接得到 41003 个 Unigenes,总长度 70. 4 Mb,平均长度 1716 bp,N50 为 2533 bp。进一步在 7009 个 Unigenes 中检测到 8494 个 EST-SSR 位点,其中 1200 条 Unigenes 含有 2 个及以上的 SSR 位点,复合型 SSRs 有 369 个。针对所有 EST-SSR位点设计得到 6494 条特异性引物,随机挑选 60 个位点进行试验验证与分析,其中 44 对引物可扩增出特异性片段,17 对具有多态性,PIC 值范围为 0. 195 ~ 0. 742,均值为 0. 501,且大部分多态性位点位于 UTR 区域。通过对皂荚近缘种进行跨种 PCR 扩增试验,结果显示在开发的 44 对有效引物中,9 个近缘种美国皂荚、日本皂荚、绒毛皂荚、滇皂荚、华南皂荚、小果皂荚、野皂荚、肥皂荚和美国肥皂荚分别有 32、31、23、24、7、40、25、18 和 18 对引物可获得有效扩增片段,说明 EST-SSR 标记在皂荚近缘种之间具有良好的通用性。研究表明利用转录组数据挖掘的 EST-SSR 位点具有扩增稳定、多态性良好、近缘种间通用等优点,是林木物种开发分子标记的有效途径之一。