基于毛细管电泳的日本落叶松 MSAP 反应体系的建立
作 者：刁姝，孙超，孙晓梅，张守攻
期刊名称：林业科学研究
影响因子：
卷 期 号：30( 3)
页 码：361 ～ 367
关键词： DNA 甲基化; 甲基化敏感扩增多态性( MSAP) ; 毛细管电泳; 体系建立; 日本落叶松
论文摘要：
［目的］建立基于毛细管电泳的日本落叶松最佳 MSAP 反应体系，获得条带清晰，信号强度均一的 DNA 甲基化
图谱，为今后开展日本落叶松表观遗传变异研究奠定基础。［方法］以日本落叶松未成熟木质部为试材，设置不同
梯度的 DNA 模板用量以及选择扩增体系中引物浓度、Mg2 + 浓度、dNTP 浓度和 exTaq DNA 聚合酶浓度，确定各组分
不同用量对毛细管电泳效果的影响，从而确立最适的 MSAP 反应体系。［结果］结果表明模板 DNA 以及 exTaq DNA
聚合酶浓度对毛细管电泳结果影响不明显，而高的引物浓度会引起条带的减少。Mg2 + 及 dNTP 浓度是影响毛细管
电泳结果最为关键的因素，浓度过低或过高会导致毛细管电泳图谱条带明显减少，杂峰显著增多。［结论］最终确
立的反应体系为: DNA 模板 100 ng，引物 0． 75 pmol·μL － 1，Mg2 + 2 mmol·L － 1，dNTP 0． 375 mmol·L － 1和 exTaq DNA聚合酶 0． 05 U·μL － 1。